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Zell- und Gewebekultur

von den Grundlagen zur Laborbank
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Author: Search for this author Lindl, Toni; Gstraunthaler, Gerhard
Year: 2008
Publisher: Heidelberg, Spektrum Akademischer Verl.
Media group: Ausleihbestand
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Content

Dieses Lehr- und Methodenbuch soll Studenten der Biologie, Medizin, Pharmazie oder Biotechnologie wie auch Wissenschaftlern und technischen Assistenten einen umfassenden Einblick in die Zell- und Gewebekultur vermitteln. Die theoretischen Grundlagen wurden verstärkt herausgearbeitet und relevante Gesetzesvorschriften aktualisiert. Praktische Tipps und Tricks in einer labor- und leserfreundlichen Aufmachung dienen dazu, die tägliche Routine im Zellkulturlabor zu erleichtern.
 
Es sind vor allem die leicht nachvollziehbaren "Man-nehme"-Vorschriften, die den praktischen Wert des Buches ausmachen und zu weiterführenden experimentellen Ansätzen anregen. Exemplarisch werden die wichtigsten Grundoperationen in der Zellkultur behandelt, sodass sich auch Anfänger bei der Kultivierung tierischer und pflanzlicher Zellen gut mithilfe des Buches einarbeiten und informieren können. Der Info-Anhang enthält stöchiometrische Rechenbeispiele, ein hilfreiches Glossar, weiterführende Literaturhinweise und Adressen von Lieferfirmen mit Internetadressen.
 
Die 6. Auflage wurde unter Mitarbeit von Prof. Gerhard Gstraunthaler, Innsbruck vollständig überarbeitet, erweitert und teilweise neu illustriert. Dabei wurde die bewährte Grundstruktur dieses Labor-"Klassikers" beibehalten und in 6 Überkapiteln zusammengefasst:
 
* Allgemeine Grundlagen der Zell- und Gewebekultur
* Die Zelle und ihre Umgebung
* Routinemethoden zur allgemeinen Handhabung kultivierter Zellen
* Spezielle Methoden und Anwendungen
* Pflanzenzellkultur
* Glossar und Anhang
 
Die umfangreichen Literaturhinweise am Ende eines jeden Kapitels wurden auf den letzten Stand gebracht. Neu hinzugekommen sind Abschnitte über „Qualitätskontrolle in der Zell- und Gewebekultur" und „Standardisierung von Zellkulturen". Beide Kapitel sollen eine „good cell culture practice" propagieren und die Notwendigkeit einer ständigen Qualitätskontrolle und standardisierter Protokolle in der Zellkultur bewusst machen. Hierbei geht es um die verlässliche Nachvollziehbarkeit von Methoden und die damit verbundene Vergleichbarkeit von Ergebnissen.
Inhaltsverzeichnis
 
I Allgemeine Grundlagen der Zell- und Gewebekultur.- 1 Räumliche und apparative Voraussetzungen.- 1.1 Der Reinigungsbereich. 1.2 Der Vorbereitungs- und Verarbeitungsbereich. 1.3 Der Sterilbereich.- 2 Steriltechnik - Kontaminationen.- 2.1 Der Sterilbereich. 2.2 Laborreinigung. 2.3 Hygiene. 2.4 "Aseptische" Arbeitstechnik. 2.5 Sterilisationsverfahren. 2.6 Antibiotika (Verwendung von Antibiotika in der Zellkultur). 2.7 Mycoplasmen. 2.8 Kreuzkontaminationen.- 3 Sicherheit in der Zellkultur.- 3.1 Sicherheitsvorschriften und Entsorgung. 3.2 Generelle Probleme.- 4 Literatur.- II Die Zelle und ihre Umgebung.- 5 Zellbiologische Grundlagen der Zell- und Gewebekultur.- 6 Kulturgefäße.- 6.1 Züchtung von Zellen auf Glas. 6.2 Züchtung von Zellen auf Plastikmaterial. 6.3 Züchtung von Zellen auf anderen Materialien. 6.4 Spezielle Kulturgefäße. 6.5 Reinigung und Vorbehandlung von Glaswaren. 6.6 Vorbehandlung von Kulturgefäßen mit Polylysin oder mit Komponenten der extrazellulären Matrix zur Modifizierung der Oberflächeneigenschaften.- 7 Zellkulturmedien.- 7.1 Zusammensetzung der Medien. 7.2 Kurze Beschreibung der gebräuchlichsten Kulturmedien. 7.3 Herstellung gebrauchsfertiger Medien.- 8 Serumfreie Zellkultur.- 8.1 DMEM/Ham-F-12-Medium. 8.2 Zusätze zu serumfreien Medien. 8.3 Übergang von serumhaltigen zu serumfreien Medien. 8.4 Serumfreie und proteinfreie Kulturmedien. 8.5 Zusammenfassung: Allgemeine Grundsätze in der Herstellung und Verwendung von Zellkulturmedien.- 9 Physiologische Zellkulturparameter.- 9.1 Osmolarität. 9.2 Temperatur. 9.3 Oxygenierung. 9.4 pH-Wert und Pufferung.- 10 Reinstwasser für Zell- und Gewebekulturen.- 10.1 Verfahren der Aufbereitung, Vorbehandlung. 10.2 Reinstwasseraufbereitungssysteme. 10.3 Lagerung von Reinstwasser. 10.4 Wasser für Reinigungszwecke.- 11 Literatur.- III Routinemethoden zur allgemeinen Handhabung kultivierter Zellen.- 12 Mediumwechsel und Fütterungszyklen.- 12.1 Mediumwechsel bei Monolayerkulturen. 12.2 Mediumwechsel bei Suspensionskulturen.- 13 Subkultivierung/Passagieren.- 13.1 Subkultivierung von Monolayerkulturen. 13.2 Subkultivierung von Suspensionskulturen.- 14 Bestimmung allgemeiner Wachstumsparameter.- 14.1 Mikroskopische Betrachtung der Kulturen. 14.2 Bestimmung der Zellzahl (und Zellmasse). 14.3 Bestimmung allgemeiner Stoffwechselparameter. 14.4 Vitalitätstests.- 15 Einfrieren, Lagerung und Versand von Zellen.- 15.1 Einfrieren von Zellen. 15.2 Lagerung der Zellen. 15.3 Auftauen von Zellen. 15.4 Versand von Zellen. 15.5 Probleme mit Zellen.- 16 Qualitätskontrolle und Cell Banking.- 16.1 Qualitätskontrolle. 16.2 Cell Banking.- 17 Standardisierung in der Zellkultur (Good Cell Culture Practice).- 18 Literatur.- IV Spezielle Methoden und Anwendungen.- 19 Allgemeine Aspekte der Primärkultur.- 19.1 Anlegen einer Primärkultur. 19.2 Seneszenz und Zellalterung. 19.3 Apoptose in der Zellkultur. 19.4 Transformation und Immortalisierung. 19.5 Literatur.- 20 Spezielle Primärkulturen.- 20.1 Kultivierung von Herzmuskelzellen des Hühnchens. 20.2 Kultivierung von Herzmuskelzellen aus neonatalen Rattenherzen. 20.3 Primärkulturen aus frischen Hautproben (Biopsien) menschlichen Ursprungs. 20.4 Isolierung von Lymphozyten aus Vollblut mittels Dichtegradientenzentrifugation. 20.5 Primärkulturen aus Mäusecerebellum (Kleinhirn). 20.6 Primärkulturen von Hepatozyten. 20.7 Isolierung und Primärkultur von Endothelzellen. 20.8 Gewinnung einer Zellkultur aus soliden Humantumoren. 20.9 Gewinnung von Keratinozyten. 20.10 Literatur.- 21 Kultivierung spezieller Zelllinien.- 21.1 Mammaliazelllinien. 21.2 Kaltblütige Vertebraten. 21.3 Invertebraten 21.4 Insektenzellen für die biotechnologische Produktion rekombinanter Proteine (Sf9-Zellen aus Spodoptera frugiperda). 21.5 Literatur.- 22 Spezielle zellbiologische Methoden in der Zellkultur.- 22.1 Transfektion. 22.2 Klonieren. 22.3 Zellfusion, Hybridoma-Technik. 22.4 Zellsynchronisation. 22.5 Cytometrie/Cell Sorting. 22.6 Versuche zur in vitro-Toxizität. 22.7 Migrationsassays. 22.8 Chromosomenpräparation. 22.9 Literatur.- 23 Organkulturen.- 23.1 Präparation eines Säugerdünndarms als Beispiel für eine Organpräparation in der Pharmakologie. 23.2 Präparation eines peripheren Nerven (oberes Halsganglion) zur Messung der neuronalen Übertragung (Neurotransmission). 23.3 Leberschnitte in vitro. 23.4 Literatur.- 24 Stammzellen und Tissue Engineering.- 24.1 Adulte Stammzellen. 24.2 Embryonaler Stammzell-Test (EST) (Spezies: Maus). 24.3 Tissue Engineering und dreidimensionale Zellkultur. 24.4 Literatur.- 25 Massenzellkultur.- V Pflanzenzellkultur.- 26 Herstellung von Kulturmedien.- 27 Kalluskulturen.- 28 Suspensionskulturen.- 29 Isolierung von Protoplasten aus Pflanzenzellkulturen.- 29.1 Elektrofusion von Pflanzenprotoplasten. 29.2 Fusion von Protoplasten mittels Polyethylenglykol.- 30 Antherenkultur.- 31 Embryonenkultur.- 32 Einfrieren und Lagerung von Pflanzenzellkulturen.- 33 Literatur.- VI Glossar und Anhang.- 34 Glossar, kleines Zell- und Gewebekulturlexikon.- 35 Anhang.- 36 Lieferfirmen und Hersteller

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Author: Search for this author Lindl, Toni; Gstraunthaler, Gerhard
Statement of Responsibility: Toni Lindl ; Gerhard Gstraunthaler
Year: 2008
Publisher: Heidelberg, Spektrum Akademischer Verl.
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ISBN: 9783827417763
Description: 6. Auflage, XV, 406 S. : Ill., graph. Darst.
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